सिटू हाइब्रिडाईजेशन में

सिटू हाइब्रिडाईजेशन में गुणसूत्र विपथन का पता लगाने के लिए एक विधि है। कुछ गुणसूत्रों को फ्लोरोसेंट रंगों से चिह्नित किया जाता है और डीएनए जांच के लिए बाध्य किया जाता है। जीन म्यूटेशन के प्रसव पूर्व निदान के लिए इस तकनीक का उपयोग किया जाता है।

सीटू संकरण में क्या है?

सीटू संकरण या मामले में स्वस्थानी संकरण में प्रतिदीप्ति आरएनए या डीएनए से न्यूक्लिक एसिड का पता कुछ ऊतकों या आणविक आनुवंशिक तरीकों का उपयोग करने वाले सेल में लगाया जाता है। आमतौर पर इस प्रकार के निदान का उपयोग गर्भावस्था के दौरान एक संरचनात्मक या संख्यात्मक गुणसूत्र असामान्यता का पता लगाने के लिए किया जाता है।

इस उद्देश्य के लिए, एक कृत्रिम रूप से निर्मित जांच का उपयोग किया जाता है, जिसमें स्वयं न्यूक्लिक एसिड होता है। यह तब आधार युग्मन के माध्यम से जीव में न्यूक्लिक एसिड को बांधता है। यह बंधन संकरण शब्द से है। साक्ष्य रोगी की जीवित संरचना पर आधारित है और इसलिए इन-सीटू साक्ष्य से मेल खाती है। यह इन-विट्रो विधियों से अलग किया जाना है जिसमें परीक्षण ट्यूब में पता लगाना होता है। इस विधि को 20 वीं शताब्दी में वैज्ञानिकों जो गैल और मैरी लू पर्ड्यू द्वारा विकसित किया गया था।

तब से तकनीक विकसित हुई है। जबकि उस समय रेडियोधर्मी जांच का उपयोग किया जाता था, उदाहरण के लिए, मार्कर अणुओं के सहसंयोजक बंधन के साथ प्रतिदीप्ति-लेबल वाले जांच का उपयोग किया जाता है।

कार्य, प्रभाव और लक्ष्य

इन-सीटू संकरण का उपयोग आमतौर पर क्रोमोसोमल विपथन का पता लगाने के लिए किया जाता है, अर्थात गुणसूत्र संबंधी विसंगतियाँ जो कि एक किलोग्राम में नहीं पाई जा सकती हैं। इसका मतलब यह है कि गर्भावस्था के दौरान वंशानुगत रोगों को निर्धारित करने के लिए विधि का उपयोग हमेशा किया जाता है।

चूंकि गुणसूत्र विपथन एक समस्या है जिसे आज कम करके नहीं आंका जाना चाहिए, समय के साथ विधि का उपयोग बढ़ गया है। मां के एमनियोटिक द्रव से देशी कोशिकाओं के आधार पर संकरण होता है। प्रौद्योगिकी का आधार डीएनए भागों में रंग-चिह्नित जांच का बंधन है। बाध्यकारी के लिए धन्यवाद, बाद में प्रतियों की संख्या का मूल्यांकन एक माइक्रोस्कोप के साथ किया जा सकता है, क्योंकि व्यक्तिगत प्रतियां एक प्रकाश संकेत का उत्सर्जन करती हैं और इस प्रकार माइक्रोस्कोप के तहत दिखाई दे सकती हैं। अलग-अलग प्रक्रियाएं हैं। या तो विश्लेषण बाध्यकारी होने के तुरंत बाद होता है।

इस मामले में, एक फ्लोरोसेंट डाई जैसे बायोटिन का उपयोग किया जाता है, जो सीधे डीएनए जांच के लिए बाध्य है। सीटू संकरण में अप्रत्यक्ष विधि के साथ, मूल्यांकन संकरण के तुरंत बाद नहीं हो सकता है, क्योंकि फ्लोरोसेंट पदार्थ केवल संकरण के बाद जांच के लिए बाध्य कर सकते हैं। इस अप्रत्यक्ष विधि का उपयोग प्रत्यक्ष रूप से अधिक बार किया जाता है क्योंकि यह माना जाता है कि यह अधिक संवेदनशील है। क्रोमोसोम-विशिष्ट सेंट्रोमीटर डीएनए जांच के अलावा, लोको-विशिष्ट डीएनए जांच, क्रोमोसोम-विशिष्ट डीएनए लाइब्रेरी जांच और तुलनात्मक जीनोम संकरण भी हैं।

क्रोमोसोम-विशिष्ट सेंट्रोमीटर डीएनए जांच का उपयोग गुणसूत्र संख्यात्मक संख्यात्मक विसंगतियों का पता लगाने के लिए किया जा सकता है। इसका मतलब यह है कि वे मुख्य रूप से उपयोग किए जाते हैं जब दोहराए गए या हटाए गए गुणसूत्रों का संदेह होता है। स्थान-विशिष्ट डीएनए जांच विशेष रूप से न्यूनतम म्यूटेशनों का पता लगाने के लिए उपयुक्त है जिन्हें कियोग्राम में नहीं पाया जा सकता है। एक गुणसूत्र-विशिष्ट डीएनए पुस्तकालय जांच विशेष रूप से सम्मिलन और अनुवाद का पता लगाने के लिए उपयोग किया जाता है।

दूसरी ओर, तुलनात्मक जीनोम संकरण, गुणसूत्र सामग्री में हानि और लाभ का एक व्यापक विश्लेषण है। आज, विभिन्न गुणसूत्र उत्परिवर्तन के निदान में इन-सीटू संकरण बहुत महत्वपूर्ण है।डाउन सिंड्रोम के निदान में, प्रोबोज गुणसूत्र 21 से बंधते हैं, उदाहरण के लिए। इस उद्देश्य के लिए, क्रोमोसोम-विशिष्ट जांच का आमतौर पर उपयोग किया जाता है, जिसका उपयोग इस बीमारी के संदेह होने पर किया जा सकता है।

एक संदेह पैदा हो सकता है, उदाहरण के लिए, अगर माता-पिता ने पहले बच्चे को बीमारी के साथ जन्म दिया है और अल्ट्रासाउंड की छवि असामान्य है। यदि एक डबल बांड के बजाय एक ट्रिपल है और इस प्रकार एक ट्रिपल कलर सिग्नल आउटपुट है, तो निदान की पुष्टि की जाती है।

जोखिम, दुष्प्रभाव और खतरे

इसके विपरीत, उदाहरण के लिए, पीसीआर, इन-सीटू संकरण संदूषण के लिए अतिसंवेदनशील काफी कम है। इसके अलावा, प्रक्रिया के लिए आवश्यक समय बेहद कम है। हालांकि, क्योंकि विशेष रूप से गुणसूत्र पैटर्न में भ्रूण, एक पैटर्न का उपयोग बाकी क्रोमोसोमल वितरण के बाकी हिस्सों और इस प्रकार अन्य कोशिकाओं की आनुवंशिक स्थिति के साथ निर्धारित करने के लिए नहीं किया जा सकता है।

रंग संकेत भी अन्य कारणों से ओवरलैप या अदृश्य रह सकते हैं। परिणामस्वरूप, निदान उपकरण के रूप में इन-सीटू संकरण गर्भावस्था के दौरान त्रुटियों के लिए अपेक्षाकृत संभावित है। गलतफहमी पैदा हो सकती है और माता-पिता एक स्वस्थ भ्रूण के खिलाफ फैसला कर सकते हैं। सीटू संकरण में त्रुटियों की संवेदनशीलता को कम करने के लिए, कम से कम दो भ्रूण कोशिकाओं की एक साथ जांच की जानी चाहिए। समानांतर में दो कोशिकाओं की जांच करके, अब केवल गलत निदान का एक नगण्य जोखिम है।

ऐसे मामले में, माता-पिता पूरी तरह से निदान पर भरोसा कर सकते हैं। हर गर्भवती महिला को इन-सीटू संकरण की पेशकश नहीं की जाती है, लेकिन केवल जोखिम समूह की महिलाओं को। फिर भी, गर्भवती महिलाओं को अपने स्वयं के अनुरोध पर इस प्रकार के निदान से इनकार नहीं किया जाता है। असामान्य अल्ट्रासाउंड निष्कर्ष या एक असामान्य सीरम डॉक्टर को नैदानिक ​​प्रक्रिया की पेशकश करने के लिए प्रेरित कर सकता है। हालांकि एक बड़ा हिस्सा है, लेकिन सभी साधनों के द्वारा, इन-सीटू संकरण का उपयोग करके गुणसूत्र विपथन का निदान किया जा सकता है।

इसलिए, इन-सीटू संकरण कभी भी अकेले नहीं किया जाना चाहिए, लेकिन हमेशा एक पारंपरिक गुणसूत्र परीक्षण के साथ संयोजन में उपयोग किया जाना चाहिए। गर्भवती महिला की देखभाल इस प्रक्रिया में एक प्रमुख भूमिका निभाती है। विश्लेषण से पहले, नैदानिक ​​पद्धति के बारे में उम्मीद की गई मां के साथ गहन चर्चा होती है, जो कि जोखिम, संभावनाओं और प्रौद्योगिकी की सीमाओं की व्याख्या करती है।